合作客戶/
拜耳公司 |
同濟大學 |
聯合大學 |
美國保潔 |
美國強生 |
瑞士羅氏 |
相關新聞Info
-
> DHSO、AGE、TMHC構建陽離子有機矽表麵活性劑DAT防水鎖性能（一）
> 無人機噴霧作業下荔枝葉片上的表麵張力、接觸角及霧滴沉積特性
> 低表麵張力物係在規整填料塔中的流體力學性能和傳質性能（一）
> 膠凝材料對引氣劑溶液表麵張力的影響
> 便攜式自動小黄片下载安装主要產品特征
> 基於孔溶液表麵張力和黏度測試揭示增稠劑對流變參數和氣泡結構的影響機製（二）
> 4種油醇烷氧基化物平衡和動態表麵張力、潤濕性、泡沫性、乳化性質研究（二）
> 基於液滴機械振動的液體表麵張力測試方法
> 十二烷基硫酸鈉、水楊酸丁酯流動驅動自推進界麵張力和表麵流速測量
> 微膠囊聚合物溶液對延展型表麵活性劑界麵張力的影響（二）
推薦新聞Info
-
> 不同因素對黏彈性顆粒驅油劑界麵張力及擴張流變參數的影響（二）
> 不同因素對黏彈性顆粒驅油劑界麵張力及擴張流變參數的影響（一）
> 不同官能度聚醚酯結構、消泡性能、表麵張力測定（三）
> 不同官能度聚醚酯結構、消泡性能、表麵張力測定（二）
> 不同官能度聚醚酯結構、消泡性能、表麵張力測定（一）
> 工業廢胺衍生捕收劑的表麵張力行為及其在鐵礦反浮選中的應用（三）
> 工業廢胺衍生捕收劑的表麵張力行為及其在鐵礦反浮選中的應用（二）
> 工業廢胺衍生捕收劑的表麵張力行為及其在鐵礦反浮選中的應用（一）
> 2,3-雙八氟戊烷基甘油醚-1-硫酸酯鈉的合成路線、表麵張力及乳化性能（一）
> 2,3-雙八氟戊烷基甘油醚-1-硫酸酯鈉的合成路線、表麵張力及乳化性能（三）
生物表麵活性劑產生菌的篩選及對PAHs汙染環境的修複效果研究（二）
來源：農業環境科學學報 瀏覽 530 次 發布時間:2025-07-31
1.4生物表麵活性劑的提取、鑒定和臨界膠束濃度測定
取培養72 h的細菌發酵液在4℃、5000×g離心30 min，取上清液用1 mol·L-1HCl調節pH為2.0，然後加入等體積的三氯甲烷/甲醇（2∶1，V∶V）混勻，萃取三次合並有機相，用無水硫酸鈉幹燥後，45℃旋轉蒸發除去有機溶劑，得到淺黃色漿狀物，即為生物表麵活性劑粗產物。
薄層色譜：取0.2 g提取的上述粗產物溶於1 mL的氯仿中，點樣於矽膠G板進行薄層色譜分析，三氯甲烷/甲醇/水（65∶15∶1，V∶V）為展開劑，用不同的顯色劑顯色。（1）苯酚-硫酸試劑：3 g苯酚與5 mL硫酸溶解於95 mL乙醇中，如果顯棕色斑點，則有糖脂存在，反之糖脂不存在；（2）茚三酮顯色劑：0.5 g茚三酮溶於100 mL丙酮中，如果斑點顯紅色，則有脂肽存在，反之脂肽不存在。
紅外掃描分析（Fouriertransforminfraredspectrometer，FT-IR）：將生物表麵活性劑粗產品溶於三氯甲烷後，在製備型矽膠薄板上進行分離，依照顯色帶位置刮下目的矽膠層，用三氯甲烷/甲烷（1∶1，V∶V）提取後於40℃下減壓蒸幹，得到部分純化的生物表麵活性劑。將上述生物表麵活性劑溶於甲醇，采用KBr壓片法（1～2 mg樣品+200 mgKBr，幹燥處理後研細），混合壓成透明薄片後紅外掃描分析測定。
發酵產物臨界膠束濃度測定（Critical micelle concentration，CMC）：精確稱取上述提取所得的產物粗品溶於蒸餾水中，配製成不同濃度梯度（0～500 mg·L-1）的產物溶液，測定溶液的表麵張力，並依據表麵活性劑濃度-表麵張力曲線求得臨界膠束濃度值。
1.5細菌發酵條件優化
1.5.1測定指標
發酵液表麵張力值以吊環法測定，乳化性能采用超聲體積比法測定。發酵液培養後，離心收集菌體，於105℃烘幹至恒重後稱重，以菌體幹重表示生物量。發酵液培養後，離心收集上清液，用等體積乙酸乙酯萃取2次後，45℃減壓蒸幹，將殘餘物溶於等體積的0.05 mol·L-1NaHCO3中，以硫酸苯酚法測定糖脂含量。
1.5.2碳源對菌株生長及產生表麵活性劑的影響
取150 mL三角瓶，每瓶中加入50 mL無機鹽培養基，分別加入10 g·L-1的葡萄糖、甘油、花生油、可溶性澱粉、液體石蠟、麥芽糖、乳糖、蔗糖（對照組不加碳源）。3 d後分別測定發酵液的表麵張力值、乳化性、生物量、糖脂含量。每個處理三次重複。
1.5.3氮源對菌株生長及產生表麵活性劑的影響
以碳源實驗中獲得的最優碳源作為選定碳源，取10 g碳源加入1 L不含（NH4）2SO4無機鹽培養基中。取150 mL三角瓶，每瓶中加入50 mL上述培養基，分別加入2 g·L-1的硝酸鈉、硫酸銨、脲、硝酸銨（對照組不加氮源）。3 d後分別測定發酵液的表麵張力值、乳化性、生物量、糖脂含量。每個處理三次重複。
1.5.4碳氮比對菌株生長及產生表麵活性劑的影響
取150 mL三角瓶，每瓶中加入50 mL含不同碳氮源的無機鹽培養基。固定氮源為2 g·L-1，分別加入已優化的碳源，控製比例為1、5、10、15、20、25、30、35、40（對照組不加氮源）。3 d後分別測定發酵液的表麵張力值、乳化性、生物量、糖脂含量。每個處理三次重複。
1.5.5溫度對菌株生長及產生表麵活性劑的影響
取150 mL三角瓶，每瓶中加入50 mL上述已優化的無機鹽培養基。控製搖床溫度在15℃、20℃、25℃、30℃、35℃、40℃。3 d後分別測定發酵液的表麵張力值、乳化性、生物量、糖脂含量。每個處理三次重複。
1.5.6 pH對菌株生長及產生表麵活性劑的影響
取150 mL三角瓶，每瓶中加入50 mL上述已優化的無機鹽培養基。控製培養基pH為4、5、6、7、8、9、10、11、12、13。3 d後分別測定發酵液的表麵張力值、乳化性、生物量、糖脂含量。每個處理三次重複。
1.5.7NaCl濃度對菌株生長及產生表麵活性劑的影響
取150 mL三角瓶，每瓶中加入50 mL上述已優化的無機鹽培養基。控製培養基NaCl濃度為0、5、10、15、20、25、30、50、80、120、160 g·L-1。3 d後分別測定發酵液的表麵張力值、乳化性、生物量、糖脂含量。每個處理三次重複。
1.5.8菌株147發酵動態圖
取150 mL三角瓶，每瓶中加入50 mL上述已優化的無機鹽培養基。在12、24、36、48、60、72、84、96、108、120、132、144 h後分別測定發酵液的表麵張力值、乳化性、生物量、糖脂含量。每個處理三次重複。
1.6生物表麵活性劑對多環芳烴增溶效果
25 mL三角瓶中加入過量的苯並［a］芘、芘、熒蒽和10 mL不同濃度的生物表麵活性劑粗產物溶液，然後加入0.02%的疊氮化鈉抑製微生物的生長。蓋好塞子並用封口膜封口後，25℃、50 r·min-1振蕩48 h後，將溶液轉移至離心管中5000 r·min-1離心15 min，取上清液加入等體積的二氯甲烷∶正己烷=1∶1（V∶V）萃取3次，收集洗脫液並於40℃濃縮至幹，用甲醇定容到2 mL，過0.22μm孔徑濾膜後HPLC分析。